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技術文章
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技術文章
2024-530
qRT-PCR（定量逆轉錄聚合酶鏈反應）和Westernblot（蛋白質印跡法）是兩種常用的生物分子檢測技術，它們分別用于檢測mRNA和蛋白質的表達水平。雖然蛋白質是由mRNA翻譯而來，但mRNA的表達水平總是與蛋白質的表達水平一致嗎？做實驗任何一個結果如果你驗證了幾遍都是一樣，那么請不要懷疑自己，也許不是你做錯了，試圖去解釋這種現象!蛋白表達和RNA水平不一致的原因有：轉錄后調控：mRNA在轉錄后可以經歷多種調控過程，如剪接、編輯、降解和穩定性調控。這些過程可以影響mRNA...
查看更多2024-530
加藥處理的細胞換液，需要遵循一定的操作步驟，確保實驗環境的無菌以及細胞的健康生長。以下是換液的一般步驟：1換液時間：一般建議每24或者48小時換液一次。2準備新的培養基：根據細胞類型和生長需求，選擇合適的培養基。確保培養基新鮮、無菌，并在使用前預熱至37℃。收集舊培養基：輕輕搖晃培養瓶，使舊培養基充分混合。使用移液器將舊培養基收集到廢液缸。注意不要觸碰到細胞表面。3添加新培養基：將收集到的舊培養基丟棄，向培養瓶中加入新的培養基。確保新的培養基充分覆蓋細胞表面，避免氣泡產生，也...
查看更多2024-522
轉染細胞效率低下的原因在生物醫學研究中，將外源基因導入細胞以研究其功能或使細胞展現出新的特性是非常常見的實驗手段。然而，轉染細胞的效率低下一直是科研人員面臨的一大難題。今天小編將探討轉染細胞效率低下的原因，以期為提高轉染效率提供有益的思路。1.細胞類型和狀態不同的細胞類型具有不同的轉染效率。一些難轉染的細胞，如神經元和肝細胞，通常需要更復雜的轉染技術。此外，細胞的生長狀態也會影響轉染效率，處于對數生長期的細胞更容易接受外源基因。如果是貼壁細胞的話，貼壁率應該在70-80%；如...
查看更多2024-522
RNA的分類1.信使RNA(mRNA)信使RNA是RNA的一種，主要功能是將DNA上的遺傳信息傳遞到蛋白質合成機器——核糖體上，從而實現蛋白質的。信使RNA的結構簡單，一般由一條單鏈RNA組成。mRNA的長度差異較大，哺乳動物的mRNA長度一般在5×102～1×105個核苷酸，這種長度的差異使得mRNA能夠攜帶更多的遺傳信息。在細胞中，mRNA的含量占到了總RNA的1%～5%，雖然mRNA的含量相對較少，但種類繁多，因為人體中約有2萬多個基因，每個基因都會產生一種mRNA。正...
查看更多2024-517
脂質體作為體內和體外輸送載體的工具，已經研究的十分廣泛，中性脂質體是利用脂質膜包裹DNA，借助脂質膜將DNA導入細胞膜內。帶正電的陽離子脂質體，DNA并沒有預先包埋在脂質體中，而是帶負電的DNA自動結合到帶正電的脂質體上，形成DNA-陽離子脂質體復合物，從而吸附到帶負電的細胞膜表面，經過內吞被導入細胞。下面讓我們一起來看看脂質體轉染的原理與方法吧！脂質體轉染操作步驟進行實驗之前，請先規劃好實驗，一般細胞轉染需要24h-72h，所以要充分了解細胞生長速度，計算所需脂質體和DNA...
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